生化需氧量的檢測是指微生物在有氧條件下，分解水中的一些可氧化物質(zhì)，尤其是有機物，進行的生化過程所消耗的溶解氧量。這個生化過程需要很長時間，在20℃下培養(yǎng)，完成這個過程需要100天。目前國內(nèi)外均以20±1℃培養(yǎng)5天為檢測指標(biāo)，分別測定水質(zhì)樣品培養(yǎng)前后溶解氧的差異。

我們今天的主要目的是讓大家了解生化需氧量（BOD）的檢測方法和意義，掌握這些方法的操作技巧。

生化需氧量檢測所需儀器

1. 恒溫培養(yǎng)箱

2. 5-20l細(xì)口玻璃瓶

3.1000-2000ml量筒

2. 玻璃攪棒：棒的長度應(yīng)比所用量筒高度長200mm，在棒的底端固定一個直徑比量筒底小，并帶有幾個小孔的硬橡膠板。

5.溶解氧瓶：250-300ml之間，帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。

6.虹吸管，供分取水樣和添加稀釋水用。

檢測生化需氧量時所用試劑

1.將8.5g磷酸二氫鉀(KH2PO3),21.75g磷酸氫二鉀(K2HPO4),33.4g七水合磷酸氫二鈉(N2HPO4·7H2O)和1.7g氯化銨(NHC)溶于水中,稀釋至1000ml此溶液的pH應(yīng)為7

2.硫酸鎂溶液

將225g七水合硫酸鎂(MgSO·7H2O)溶于水中,稀釋至1000ml。

3.氯化鈣溶液

將27.5g無水氯化鈣溶于水中,稀釋至1000ml。

4.氯化鐵溶液

將0.25g六水合氯化鐵(FeCl3·6H2O)溶于水中,稀釋至1000ml。

5.鹽酸溶液(0.5mol/L)

將40ml鹽酸(=1.18g/m)溶于水中,稀釋至1000ml。

6.＞氫氧化鈉溶液(0.5mol/L)

將20g氫氧化鈉溶于水中,稀釋至1000ml。

7.亞硫酸鈉溶液(1/2Na2SO2=0.025mol/L)

將1.575g亞硫酸鈉溶于水中,稀釋至1000ml。此溶液不穩(wěn)定,需每天配制。

8.葡萄糖一谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液

將葡萄糖(CH2O)和谷氨酸( HOOC--CH2CH2CHNH2-OOH)在103℃干燥1h后,各稱取150mg溶于水中,移入1000ml容量瓶內(nèi)并稀釋至標(biāo)線,混合均勻,此標(biāo)準(zhǔn)溶液臨用前配制。

9.稀釋水

在5~20L玻璃瓶內(nèi)裝入一定量的水,控制水溫在20℃左右。然后用無油空氣壓縮機或薄膜泵,將吸入的空氣先后經(jīng)活性炭吸附管及水洗滌管后,導(dǎo)入稀釋水內(nèi)曝氣2~8h,使稀釋水中的溶解氧接近于飽和。停止曝氣亦可導(dǎo)入適量純氧。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布,置于20℃培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時,使水中溶解氧含量達8mg/L左右。臨用前每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸緩沖溶液各1ml,并混合均勻。

稀釋水的pH應(yīng)為7.2,其BOD應(yīng)小于0.2mng/L

10.接種液

可選擇以下任一方法,以獲得適用的接種液。

①城市污水,一般采用生活污水,在室溫下放置一晝夜,取上層清液供用。

②表層土壤浸出液,取100g花園或植物生長土壤,加入1L水,混合并靜止10min,取上清液供用

③用含城市污水的河水或湖水

④污水處理廠的出水

⑤當(dāng)分析含有難于降解物質(zhì)的廢水時,在其排污口下游3~8km處取水樣作為廢水的馴化接種液。如無此種水源,可取中和或經(jīng)適當(dāng)稀釋后的廢水進行連續(xù)曝氣,每天加入少量該種廢水,同時加入適量表層土壤或生活污水,使能適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖。當(dāng)水中出現(xiàn)大量絮狀物,或檢查 其化學(xué)需氧量的降低值出現(xiàn)突變時,表明適用的微生物已進行繁殖,可用作接種液。一般馴化過程需要3~8d。

11.接種稀釋水

分取適量接種液,加于稀釋水中,混勻。每升稀釋水中接種液加入量為:生活污水1~10ml;或表層土壤浸出液20~30ml;或河水、湖水10~100ml。

接種稀釋水的pH值應(yīng)為7.2,BOD值以在0.3~1.Omg/L之間為宜。接種稀釋水配制后應(yīng)立即使用。

檢測水中生化需氧量

1.不經(jīng)稀釋水樣的測定

(1)溶解氧含量較高、有機物含量較少的地面水,可不經(jīng)稀釋,而直接以虹吸法,將約20℃的混勻水樣轉(zhuǎn)移入兩個溶解氧瓶內(nèi),轉(zhuǎn)移過程中應(yīng)注意不使產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個溶解氧瓶充滿水樣后溢出少許,加塞。瓶內(nèi)不應(yīng)有氣泡。

(2)其中一瓶隨即測定溶解氧,另一瓶的瓶口進行水封后,放入培養(yǎng)箱中，在20+1℃培養(yǎng)5d。在培養(yǎng)過程中注意添加封口水。從開始放入培養(yǎng)箱算起,經(jīng)過五晝夜后,棄去封口水,測定剩余的溶解氧。

2.需經(jīng)稀釋水樣的測定

(1)稀釋倍數(shù)的確定:根據(jù)實踐經(jīng)驗,提出下述計算方法,供稀釋時參考。

①地表水:由測得的高錳酸鹽指數(shù)與定的系數(shù)的乘積,求得稀釋倍數(shù)。

②工業(yè)廢水:由重鉻酸鉀法測得的COD值來確定。通常需做三個稀釋比。使用稀釋水時,由COD值分別乘以系數(shù)0.075、0.15、0.225,即獲得三個稀釋倍數(shù)。使用接種稀釋水時,則分別乘以0.075、0.15和0.25三個系數(shù)。

注意: CODer值可在測定COD過程中,加熱回流至60min時,用由校核試驗的鄰苯二甲酸氫鉀溶液按COD測定相同操作步驟制備的標(biāo)準(zhǔn)色列進行估測。

后通過計算得出不經(jīng)稀釋直接培養(yǎng)水質(zhì)樣品的生化需氧量，已經(jīng)稀釋后培養(yǎng)水樣的生化需氧量。